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    江苏快三有赢钱的吗: 2015最新版中药材中黄曲霉毒素整体检测方案

    郑州市国达仪器设备有限公司2015年12月14日 8:44 点击:541

    时时彩网络平台 www.qlgr.net 2015最新版中药材中黄曲霉毒素整体检测方案

    提要:2013年国家药典委员会在官网上公布了“关于中药中重金属、农残、黄曲霉毒素等物质限量标准草案的公示”——为进一步加强中药材的质量控制,根据国家食品药品监督管理局的部署和安排,经国家药典委委员会有关单位和专家对黄曲霉毒素、重金属及有害元素、农药残留量等有害物质的控制方法、限度值以及重点品种进行试验研究,拟在2010年版《中国药典》的基础上,进一步增加中药的安全性指标控制项目,尤其是加强对中药材中重金属及有害元素、黄曲霉毒素、农药残留量的控制。2015版中国药典对黄曲霉毒素监控又更加完善,执行标准也有了新的增加与提高.

    2015最新版中药材中黄曲霉毒素整体检测方案
    中国仪器色谱网全面结合2015版《中华人民共和国药典》,以药品GMP指南为依据,总编了黄曲霉毒素整体检测方案:中药材中黄曲霉毒素整体检测方案2015最新版
    一、关于黄曲霉毒素限量标准:对《中国药典》收载的柏子仁、莲子、使君子、槟榔、麦芽、肉豆蔻、决明子、远志、薏苡仁、大枣、地龙、蜈蚣、水蛭、全蝎等14味药材及其饮片品种项下增加“黄曲霉毒素”检查项目,限度为“黄曲霉毒素B1不得过μg/kg;黄曲霉毒素G2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素B2总量不得过10 μg/kg”。
    二、方法简介
    样品经过甲醇-水提取,提取液经过滤、稀释后,经过含有黄曲霉毒素特异抗体的免疫亲和柱净化,此抗体对黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2具有专一性,黄曲霉毒素交联在层析介质中的抗体上。首先用水或吐温-20/PBS将免疫亲和柱上的杂质除去,然后用甲醇通过免疫亲和层析柱洗脱,洗脱液通过带荧光检测器的高效液相色谱仪柱后碘溶液衍生,测定黄曲霉毒素的含量;也可采用高效液相色谱仪柱后光化学衍生在254 nm 下用光化学的方法对黄曲霉毒素B1G1进行衍生测定黄曲霉毒素的含量。
    三、分析步骤
    1.  
    提取
    取供试品粉末(柏子仁、莲子、使君子、槟榔、麦芽、肉豆蔻、决明子、远志、薏苡仁、大枣、地龙、蜈蚣、水蛭、全蝎等14味药材及其饮片及其制品)约15 g(过二号筛),精密称定,加入氯化钠3 g,置于均质瓶中,加入70%甲醇溶液75 mL,高速搅拌2分钟(搅拌速度大于11 000/分),离心5分钟(离心速度2 500/分),精密量取上清液15 mL,置于50 mL 量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,用微孔滤膜(0.45 μm)滤过,待净化。
     2.  
    净化
    免疫亲和柱:Welchrom ?Immunoaffinity Column3 mL)(以下部分简写为Welchrom ?IAC
    1)上样:将准确移取15. 0 mL 样品提取液注入Welchrom ?IAC,调节空气压力泵的压力使溶液以约6 mL /min 流速缓慢通过免疫亲和柱,直至2 mL-3 mL 空气通过柱体,随后调节开关,使液体以1-2 d/s 的速度流出;
    2)淋洗:以10 mL 水淋洗免疫亲和柱两次,弃去全部流出液,并使2 mL~3 mL 空气通过Welchrom ?IAC,流速为2-3 d/s;
    3)洗脱:准确加入1. 0 mL 色谱级甲醇洗脱,流速为1 mL/min~2 mL/min,收集全部洗脱液于玻璃试管中,供检测用,流速为1 d/s。
    注:(1)免疫亲和柱的储存温度为2~8℃,使用前应注意回温,防止因免疫亲和柱内抗体在低温条件下失活而导致净化效果不够理想;
    2)上样溶液中有机相的比例不能超过25%~30%,否则会因为有机溶剂的比例过高而导致净化效果不够理想;
    3)洗脱后液体可用于HPLC检测。(建议用水11稀释后上样)。
     3.  
    测定
    1)高效液相色谱条件
    色谱柱:XB-C18,μm, 4.6×150 mm
    流动相:甲醇:乙腈:水(401842
    流速:0. 8 mL/min
    荧光检测器激发波长365 nm,发射波长445 nm
    经色谱柱分离的黄曲霉毒素需经过光化学衍生器衍生出峰顺序:G2\G1\B2\B1
    ①碘溶液柱后衍生化法
    衍生溶液:0. 05%碘溶液(称取碘0.5 g,加入甲醇100 mL 使其溶解,用水稀释至1000 mL
    衍生溶液流速:0. 3 mL/min
    反应管温度:700 
    反应时间:1 min
     光化学衍生法:光化学衍生器(254 nm)。
    2)定量
    精密量取黄曲霉毒素混合标准品(黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2标示的浓度分别为1.0 μg/mL、0.3 μg/ mL、1. μg/ mL、 0.3 μg/ mL),置于10 mL 量瓶中,用甲醇稀释至刻度,作为储备液。精密量取储备液1 mL,置于25 mL 量瓶中,用甲醇稀释至刻度,即得。
    分别精密吸取上述混合对照品溶液μL、10 μL、15 μL、20 μL、25 μL,注入液相色谱仪,测定峰面积,以峰面积为纵坐标,进样量为横坐标,绘制标准曲线。另吸取上述试品溶液20~25 μl,注入液相色谱仪,测定峰面积,从标准曲线上读出供试品中相当于黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的量,计算,即得。
    取样品洗脱液1. 0 mL 加入重蒸馏水定容至2. 0 mL,用进样器吸取100  μ注入高效液相色谱仪,在上述色谱条件下测定试样的响应值(峰高或峰面积)。经过与黄曲霉毒素标准溶液谱图比较响应值得到试样中黄曲霉毒素B1、B2、G1G2的浓度。
      
    咨询热线:400-115-8566

    黄曲霉毒素检测耗材:
    滤纸;
    漏斗;
    锥形瓶:100ml;
    玻璃纤维过滤器;
    10 ml 
    —次性注射器;
    吐温20;
    磷酸氢二钠;
    磷酸二氢钾;
    氯化钾;
    氯化钠;
    甲醇,分析纯;
    甲醇,色谱纯;
    乙腈,色谱纯;
    正己烷,分析纯;

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    中药材中黄曲霉毒素整体检测方案2015最新版:

    //www.guodasepu.com/c/view.php?aid=13151
    中国仪器色谱网:www.guodasepu.com




     


    (来源: 郑州市国达仪器设备有限公司


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