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    江苏省大学排名: 兔钙调磷酸酶(CaN)酶免elisa试剂盒说明书

    上海圻明生物科技有限公司2013年5月25日 15:23 点击:839

    时时彩网络平台 www.qlgr.net <p>&nbsp;兔钙调磷酸酶(CaN)酶免试剂盒说明书</p> <div>本试剂盒仅供研究使用。</div> <div>检测范围: 96T</div> <div>1,2U/L &ndash; 50U/L</div> <div>使用目的:</div> <div>本试剂盒用于测定兔血清、血浆及相关液体样本中钙调磷酸酶(CaN)活性。</div> <div>实验原理</div> <div>本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中兔钙调磷酸酶(CaN)水平。用纯化的兔钙调磷酸</div> <div>酶(CaN)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入钙调磷酸酶(CaN),</div> <div>再与HRP 标记的钙调磷酸酶(CaN)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗</div> <div>涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终</div> <div>的黄色。颜色的深浅和样品中的钙调磷酸酶(CaN)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定</div> <div>吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中兔钙调磷酸酶(CaN)活性浓度。</div> <div>试剂盒组成</div> <div>1 30 倍浓缩洗涤液 20ml&times;1 瓶 7 终止液 6ml&times;1 瓶</div> <div>2 酶标试剂 6ml&times;1 瓶 8 标准品(80U/L) 0.5ml&times;1 瓶</div> <div>3 酶标包被板 12 孔&times;8 条 9 标准品稀释液 1.5ml&times;1 瓶</div> <div>4 样品稀释液 6ml&times;1 瓶 10 说明书 1 份</div> <div>5 显色剂A 液 6ml&times;1 瓶 11 封板膜 2 张</div> <div>6 显色剂B 液 6ml&times;1/瓶 12 密封袋 1 个</div> <div>标本要求</div> <div>1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能</div> <div>马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融</div> <div>2.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。</div> <div>操作步骤</div> <div>1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀</div> <div>释。</div> <div>40U/L 5 号标准品 150&mu;l 的原倍标准品加入150&mu;l 标准品稀释液</div> <div>20U/L 4 号标准品 150&mu;l 的5 号标准品加入150&mu;l 标准品稀释液</div> <div>10U/L 3 号标准品 150&mu;l 的4 号标准品加入150&mu;l 标准品稀释液</div> <div>5U/L 2 号标准品 150&mu;l 的3 号标准品加入150&mu;l 标准品稀释液</div> <div>2.5U/L 1 号标准品 150&mu;l 的2 号标准品加入150&mu;l 标准品稀释液</div> <div>2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、</div> <div>待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50&mu;l,待测样品孔中先加样品稀释液40&mu;l,</div> <div>然后再加待测样品10&mu;l(样品最终稀释度为5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽</div> <div>量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。</div> <div>3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。</div> <div>4. 配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用</div> <div>5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此</div> <div>重复5 次,拍干。</div> <div>6. 加酶:每孔加入酶标试剂50&mu;l,空白孔除外。</div> <div>7. 温育:操作同3。</div> <div>8. 洗涤:操作同5。</div> <div>9. 显色:每孔先加入显色剂A50&mu;l,再加入显色剂B50&mu;l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色</div> <div>15 分钟.</div> <div>10. 终止:每孔加终止液50&mu;l,终止反应(此时蓝色立转黄色)。</div> <div>11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止</div> <div>液后15 分钟以内进行。</div> <div>操作程序总结:</div> <div>计算</div> <div>以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的</div> <div>OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD 值计算出标</div> <div>准曲线的直线回归方程式,将样品的OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,</div> <div>即为样品的实际浓度。</div> <div>注意事项</div> <div>1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未</div> <div>用完,板条应装入密封袋中保存。</div> <div>2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。</div> <div>3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好</div> <div>控制在5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。</div> <div>4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值</div> <div>大于标准品孔第一孔的OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计</div> <div>算时请最后乘以总稀释倍数(&times;n&times;5)。</div> <div>5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。</div> <div>6.底物请避光保存。</div> <div>7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.</div> <div>8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。</div> <div>9.本试剂不同批号组分不得混用。</div> <div>10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。</div> <div>保存条件及有效期</div> <div>1.试剂盒保存:;2-8℃。</div> <div>2.有效期:6 个月</div>

    (来源: 上海圻明生物科技有限公司


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