• “蛟龙” 吸引世界目光(砥砺奋进的五年·重大工程巡礼) 2019-08-19
  • 李克强:扩大跨省异地就医直接结算范围 2019-08-11
  • 次仁卓玛一家的端午节 2019-08-11
  • 市人大常委会召开党组会议传达学习全国两会精神张轩主持并讲话 2019-08-09
  • 世界杯期间在家撸串的正确姿势-热门标签-华商网数码 2019-08-06
  • 兴业银行获第十二届人民企业社会责任奖年度企业奖 2019-08-02
  • 宝马中国创新日暨上海研发中心揭幕 专注于高新技术 2019-08-01
  • 解放军报评论员:担当起党和人民赋予的新时代使命任务 2019-08-01
  • 别人家的中年男子 听音识木一把琴能卖30万 2019-07-18
  • 《贪婪之秋》延期至2019年 E3新宣传片公开 2019-06-25
  • 《关于发展租赁型职工集体宿舍的意见(试行)》正式发布实施 2019-06-24
  • 网约车陷阱多 谨防四类风险 2019-06-19
  • 太原设禁鸣路段 设备在测试中 2019-06-19
  • 歌浴森专辑写真曝光 俏皮可爱萌态十足 2019-06-09
  • 破11个赛季不胜魔咒 山东客场击败广厦 2019-06-09
  • 来宝网Logo

    热门词:生物显微镜 水质分析仪 微波消解 荧光定量PCR 电化学工作站 生物安全柜

    现在位置时时彩网络平台>技术资料首页>行业动态>公司动态>钙黄绿素, AM

    时时彩官方开奖: 钙黄绿素, AM

    西安百萤生物科技有限公司2018年11月1日 9:02 点击:285

    时时彩网络平台 www.qlgr.net 简介

    Calcein AM是一种疏水性化合物,可以很容易地渗透到完整的活细胞中。 它广泛用于细胞活力测定。 通过细胞内酯酶水解非荧光钙黄绿素AM产生强荧光的亲水钙黄绿素,其在细胞质中良好保留。 酯酶活性与活细胞数成正比,因此与荧光强度直接相关钙黄绿素产生自酯酶催化的钙黄绿素AM水解。 Calcein AM是用于标记和监测活细胞细胞功能的最流行的荧光探针之一。 然而,Calcein AM的单色使得在多色应用中不可能使用这种有价值的试剂。 例如,由于钙黄绿素AM具有与GFP相同的颜色,因此不可能将钙黄绿素AMGFP转染的细胞组合使用。

    光谱特性

    为了解决上述Calcein AM的颜色限制,我们开发了Calcein Orange?和Calcein Red?。 这两种新的Calcein AM类似物与Calcein AM结合使用,可以对活细胞进行多色标记和功能分析。 此外,我们还开发了CytoCalcein?Violet 450,CytoCalcein?Violet 500,CytoCalcein?Blue 550CytoCalcein?Blue 600,用于流式细胞仪应用。 CytoCalcein?染料与Calcein具有相似的生物学特性,它们针对各种流式细胞仪的激发波长进行了优化,为活细胞的流式细胞分析提供了额外的颜色。 CytoCalcein?Violet 450CytoCalcein?Violet 500被紫激光(405 nm)激发,并分别在450 nm500 nm发出荧光。 CytoCalcein?Blue 550CytoCalcein?Blue 550被蓝色激光(488 nm)激发,并分别在550 nm600 nm处发出荧光。

    1.细胞活力检测试剂的光谱特性

    1541033935(1).jpg

    使用细胞活力指标AM酯类

    AM酯是非极性酯,其易于穿过活细胞膜,并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。 AM酯广泛用于非侵入性地将各种极性荧光探针加载到活细胞中。 但是,使用AM酯时必须小心,因为它们易于水解,特别是在溶液中。 它们应在使用前重新配制优质无水二甲基亚砜(DMSO)。 DMSO储备溶液可以在-20℃下干燥储存并避光。 在这些条件下,AM酯应稳定数月。

    以下是我们推荐的将AM酯加载到活细胞中的方案。 该步骤仅提供指南,应根据您的特定需求进行修改。

    a)在高质量无水DMSO中制备25mM AM酯的储备溶液。非离子的洗涤剂Pluronic?F-127有时用于增加AM酯的水溶性。

    注意:可将等体积的20Pluronic?F-127溶液添加到DMSO储备溶液中细胞活力指示剂在稀释到上样缓冲液之前。最终的Pluronic?F-127

    浓度约为0.02%。各种Pluronic?F-127解决方案可从AAT获取

    注意:不建议在Pluronic?F-127存在下长期储存AM酯。

    b)在实验当天,要么在DMSO中溶解细胞活力的固体指标,要么溶解细胞活力将等份的指示剂储备溶液解冻至室温。准备一个有效的解决方案在您选择的缓冲液中110μM(如HanksHepes缓冲液)。对于大多数细胞建议最终浓度范围为45μM的细胞活力指标。细胞加载所需指标的确切浓度必须根据经验确定。

    c)如果您的细胞含有有机阴离子转运蛋白,丙磺舒(1-2.5 mM)或磺吡酮可以向细胞培养基中加入(0.1-0.25mM)以减少脱酯化指示剂的泄漏。在室温或37℃下将细胞与AM酯孵育20分钟至1小时。

    注意:降低加载温度可能会降低指示器的划分。

    d)在细胞活力指示剂缓冲液(含有阴离子转运蛋白抑制剂,如果适用)中洗涤细胞以除去过量的探针。

    注意:通过流式细胞术立即分析细胞样品,以确定零时间的每个细胞的平均荧光而不洗涤。

    e)在所需的Ex / Em波长下进行实验(见表1)。

    储存条件:

    储存于-20°C,避光。 到期日为自收到之日起6个月。

    参考文献

    1. Zibek S, Stett A, Koltay P, Hu M, Zengerle R, Nisch W, Stelzle M. (2006) Localized functional chemical stimulation of TE 671 cells cultured on nanoporous membrane by calcein and acetylcholine. Biophys J.

    2. Klesius PH, Evans JJ, Shoemaker CA, Pasnik DJ. (2006) A vaccination and challenge model using calcein marked fish. Fish Shellfish Immunol, 20, 20.

    3. Bratosin D, Mitrofan L, Palii C, Estaquier J, Montreuil J. (2005) Novel fluorescence assay using calcein-AM for the determination of human erythrocyte viability and aging. Cytometry A, 66, 78.

    4. Schoonen WG, Westerink WM, de Roos JA, Debiton E. (2005) Cytotoxic effects of 100 reference compounds on Hep G2 and HeLa cells and of 60 compounds on ECC-1 and CHO cells. I mechanistic assays on ROS, glutathione depletion and calcein uptake. Toxicol In Vitro, 19, 505.

    5. Uggeri J, Gatti R, Belletti S, Scandroglio R, Corradini R, Rotoli BM, Orlandini G. (2004) CalceinAM is a detector of intracellular oxidative activity. Histochem Cell Biol, 122, 499.

    6. Mueller H, Kassack MU, Wiese M. (2004) Comparison of the usefulness of the MTT, ATP, and calcein assays to predict the potency of cytotoxic agents in various human cancer cell lines. J Biomol Screen, 9, 506.

    7. Iwanowicz LR, Densmore CL, Ottinger CA. (2004) Calcein AM release-based cytotoxic cell assay for fish leucocytes. Fish Shellfish Immunol, 16, 127. 8. Tokudome Y, Sugibayashi K. (2003) The synergic effects of various electrolytes and electroporation on the in vitro skin permeation of calcein. J Control Release, 92, 93.


    (来源: 西安百萤生物科技有限公司


    全年征稿 / 资讯合作

    联系邮箱:[email protected]

    版权与免责声明

    • 凡本网注明“来源:来宝网”的所有作品,版权均属于来宝网,转载请必须注明来宝网, 时时彩网络平台,违反者本网将追究相关法律责任。
    • 本网转载并注明自其它来源的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点或证实其内容的真实性,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品来源,并自负版权等法律责任。
    • 如涉及作品内容、版权等问题,请在作品发表之日起一周内与本网联系,否则视为放弃相关权利。


  • “蛟龙” 吸引世界目光(砥砺奋进的五年·重大工程巡礼) 2019-08-19
  • 李克强:扩大跨省异地就医直接结算范围 2019-08-11
  • 次仁卓玛一家的端午节 2019-08-11
  • 市人大常委会召开党组会议传达学习全国两会精神张轩主持并讲话 2019-08-09
  • 世界杯期间在家撸串的正确姿势-热门标签-华商网数码 2019-08-06
  • 兴业银行获第十二届人民企业社会责任奖年度企业奖 2019-08-02
  • 宝马中国创新日暨上海研发中心揭幕 专注于高新技术 2019-08-01
  • 解放军报评论员:担当起党和人民赋予的新时代使命任务 2019-08-01
  • 别人家的中年男子 听音识木一把琴能卖30万 2019-07-18
  • 《贪婪之秋》延期至2019年 E3新宣传片公开 2019-06-25
  • 《关于发展租赁型职工集体宿舍的意见(试行)》正式发布实施 2019-06-24
  • 网约车陷阱多 谨防四类风险 2019-06-19
  • 太原设禁鸣路段 设备在测试中 2019-06-19
  • 歌浴森专辑写真曝光 俏皮可爱萌态十足 2019-06-09
  • 破11个赛季不胜魔咒 山东客场击败广厦 2019-06-09
  • 玩快三群里个个赢钱 波克捕鱼百人牛牛没了 彩票模板 极速快乐十分网址 足彩总进球玩法举例 南粤风釆36选7今天开奖结果 南粤36选7近30期开奖号码 中国体彩网鲁德权 310免费足球直播 十一运夺金走势图新浪爱彩 上海基诺开奖号 南粤36选7开奖结果 体育彩票河北11选5开奖结果 江苏快3上宏发玩 网易彩票排列三走势图