• 李克强:扩大跨省异地就医直接结算范围 2019-08-11
  • 次仁卓玛一家的端午节 2019-08-11
  • 市人大常委会召开党组会议传达学习全国两会精神张轩主持并讲话 2019-08-09
  • 世界杯期间在家撸串的正确姿势-热门标签-华商网数码 2019-08-06
  • 兴业银行获第十二届人民企业社会责任奖年度企业奖 2019-08-02
  • 宝马中国创新日暨上海研发中心揭幕 专注于高新技术 2019-08-01
  • 解放军报评论员:担当起党和人民赋予的新时代使命任务 2019-08-01
  • 别人家的中年男子 听音识木一把琴能卖30万 2019-07-18
  • 《贪婪之秋》延期至2019年 E3新宣传片公开 2019-06-25
  • 《关于发展租赁型职工集体宿舍的意见(试行)》正式发布实施 2019-06-24
  • 网约车陷阱多 谨防四类风险 2019-06-19
  • 太原设禁鸣路段 设备在测试中 2019-06-19
  • 歌浴森专辑写真曝光 俏皮可爱萌态十足 2019-06-09
  • 破11个赛季不胜魔咒 山东客场击败广厦 2019-06-09
  • 喝了6瓶劲酒和1斤白酒 男子手持钢锯在重庆西站撒泼遭控制 2019-06-01
  • 来宝网Logo

    热门词:生物显微镜 水质分析仪 微波消解 荧光定量PCR 电化学工作站 生物安全柜

    现在位置时时彩网络平台>技术资料首页>产品信息>说明书>胰岛素原(PI)ELISA试剂盒使用说明书

    时时彩平台总代理: 胰岛素原(PI)ELISA试剂盒使用说明书

    厦门慧嘉生物科技有限公司2010年6月3日 18:29 点击:1185

    时时彩网络平台 www.qlgr.net  

    胰岛素原(PI)ELISA试剂盒使用说明书

    本试剂盒仅供研究使用。

    1 使用目的:

    本试剂盒用于饲料、鱼、虾和肉类组织(如鸡、牛肉和猪肉),鸡蛋、蜂蜜、牛奶、血清和尿样中胰岛素原(PI)残留的定量检测。

    2 实验原理

    本试剂盒采用竞争ELISA方法,在微孔板包被有胰岛素原(PI)偶联抗原,加入胰岛素原(PI)标准品或样品,游离胰岛素原(PI)与微孔条上预包被的胰岛素原(PI)偶联抗原互相竞争抗胰岛素原(PI)抗体酶标记物,用TMB底物显色,加入终止液后颜色由蓝色变为黄色,用酶标仪在450nm波长下进行检测,吸光值与样品中胰岛素原(PI)含量成反比,通过标准曲线计算样品中胰岛素原(PI)的含量。  

    3 试剂盒组成

    3.1 预包被的胰岛素原(PI)偶联抗原的可拆酶标板:1块(12孔×8条)。
    3.2 胰岛素原(PI)标准品:6瓶(1ml/瓶),含量分别是: 0 ppm,0.1 ppm,0.3 ppm,0.9 ppm,2.7 ppm,8.1 ppm。
    3.3抗胰岛素原(PI)抗体酶结合物:1瓶(6ml)。
    3.4显色液A:1瓶(6ml)。
    3.5显色液B:1瓶(6ml)。
    3.6终止液:1瓶(6ml),2M硫酸。
    3.7样本稀释液:1瓶(10×, 6ml),用于样品稀释用。
    3.8浓缩洗涤液:1瓶(20×,20ml),用于洗板。
    3.9说明书一份。


     

    4 需要而未提供的材料
    4.1 设备
    4.1.1波长450nm酶标仪。
    4.1.2粉碎机。
    4.1.3量筒。
    4.1.4振荡器。
    4.1.5漏斗。
    4.1.6Whatman No 1或相当的滤纸。
    4.1.7微量移液器。
    4.2 试剂
    4.2.1去离子水或蒸馏水。
    4.2.2 甲醇。
    5 贮存
    5.1 试剂盒贮存于2~8,切勿冷冻
    5.2 未用完的微孔板应该密封干燥保存
    6 注意事项
    6.1 使用试剂盒前请仔细阅读说明书。
    6.2 不要使用过期试剂盒。
    6.3 试剂盒使用前,将试剂恢复至室温(25±2),建议至少回温2小时。
    6.4 标准品中含有胰岛素原(PI),使用时应特别注意,操作时应带手套。
    6.5 终止液中含有硫酸,使用时防止灼伤皮肤及腐蚀衣物。
    6.6 不同标准品、样品所用吸头不能混用,否则会影响试验结果。
    6.7 不同批号试剂盒中的试剂不得混用;不同标准品、样品所用吸头不得混用,否则会影响实验结果。
    6.8 稀释样本时必须用本试剂盒中的样本稀释液,否则会影响实验结果
    6.9 混合试剂时应避免起泡。
    7 工作液准备
    7.1 胰岛素原(PI)标准品溶液:0ppm,0.1ppm,0.3 ppm,0.9ppm,2.7 ppm,8.1ppm
    7.2 浓缩洗涤液:用蒸馏水按1:20(1+19)稀释备用

    7.3 样本稀释液:用蒸馏水按1:10(1+9)稀释备用
    7.3 显色剂:已备用,避免光线直照
    7.4 反应终止液:已备用
    8 样品处理程序(样品在提取过程中,要严格按说明书操作,提取过程中应准确稀释,否则会出现结果不准确,样品应当保存在阴凉避光之处及冷藏保存)
    8.1取10g粉碎的样品,加 20ml 70%甲醇溶液
    8.2强力振荡3分钟
    8.3用Whatman No 1滤纸过滤
    8.4取100µl处理后的样品,加入400µl样本稀释液
    8.5取50μl稀释后的样本进行分析(稀释倍数5)
    9 酶免分析步骤
    9.1 实验须知
    9.1.1 实验开始前请将所有试剂于盒外充分恢复至室温(25±2),时间约2小时?;匚轮潦椅拢?5±2)后再取出微孔条,多余的微孔条重新密封立即于2~8干燥保存
    注:一定保证回温充分,否则影响检测的精确度和准确度。
    9.1.2 使用后请立即将试剂放回2~8保存
    9.1.3 请不要改变分析程序
    9.1.4 请使用精确的微量移液器
    9.1.5 操作一旦开始,请不要中断任何程序
    9.1.6 ELISA结果的可重复性极大程度的取决于操作程序,请严格按照要求操作
    9.1.7 为避免交叉污染,每个标准品和样品均应使用不同的吸头加样
    9.1.8 加样时请勿让吸头接触微孔中的溶液或内表面
    9.2 分析步骤
    9.2.1 预先进行编号,标记B0、标准品和样品的位置,推荐进行双孔检测
    9.2.2 取所需数量的微孔(微孔条可拆),将多余板条重新密封并立即放回2~8保存
    9.2.3 样品稀释液(10×)、浓缩洗涤液(10×)稀释成工作液(蒸馏水或去离子水稀释)
    9.2.4 在B0孔中加入50µl0.0 ng/ ml标准品溶液
    9.2.5 在各标准孔中加入50μl的标准品溶液
    9.2.6 在各样品孔中加入50µl样品溶液
    9.2.7 在所有孔中加入50µl的抗胰岛素原(PI)抗体酶结合物
    9.2.8 轻轻晃动反应板几秒钟。
    9.3 37温浴30min (温浴过程中不时轻拍反应板,可以减少双孔误差)
    9.3.1 甩掉孔中液体,用洗液洗涤微孔板5次,最后一次应在吸水纸上拍打以完全除去孔中液体。
    9.4 反应
    9.4.1 洗涤程序完成后,立即用微量移液器在每个微孔中先加入50µl显色液A,再加 50µl显色液B;轻微晃动反应板使之彻底混匀
    9.4.2 37温浴10min
    9.4.3 每孔中加入50µl终止液,混匀
    9.4.4 在450nm下检测吸光度,结果在5min内读取。
    10 结果计算
    10.1定量分析
    10.1.1所获得的每个浓度标准溶液和样本吸光度值的平均值(B)除以第一个标准(0标准)的吸光度值(B0)再乘以100%,即百分吸光度值。
    B—标准溶液或样本溶液的平均吸光度值
    B0—0µg/L标准溶液的平均吸光度值
    10.1.2以胰岛素原(PI)浓度的对数值为X轴,百分吸光度值为Y轴,绘制标准曲线图。根据样品百分吸光度值,可从曲线上得到对应点的横坐标,即为胰岛素原(PI)浓度的对数值,求得反对数即为测定液中胰岛素原(PI)浓度C(ppm)
    10.1.3由于样品经过了预先稀释,因此根据标准曲线所得出的样品浓度一定要再乘以其稀释倍数。
    10.2 半定量测定
    10.1.1目测半定量测定:首先选择一个适当的标准液与样品同运行,根据样品与标准品吸光度值的高低比较,判断样品浓度值是小于还是大于标准值。
    10.1.2仪器半定量测定:首先选择一个适当的标准液与样品同运行,根据样品与标准品颜色深浅比较,判断样品浓度值是小于还是大于标准值。

     


     

    11 特异性
    物质 交叉反应
    胰岛素原(PI) 100%
    胰岛素(Insulin)  <0.04%
    12 试剂盒参数
    本试剂盒检测下限为0.05ppb
    B0吸光度最佳值应大于1.0
    试剂盒吸光度板内误差小于8%,板间误差小于15%。
    用本说明书提供的组织样本提取方法回收率大于80%。
    13 标准曲线模式(仅供参考)
    试剂盒提供的标准曲线范围为0.1ppm~8.1ppm。

    14 分析限制
    本试剂盒检测为阳性的样品应该用另一种方法如HPLC或GC/MS加以确证。


     

     

     

    厦门慧嘉生物科技有限公司专业代理众多国际生命科学领域的知名品牌。致力于各种ELISA试剂盒、免疫组化试剂盒、一抗二抗、细胞因子、生物试剂、移液器、耗材的销售推广及服务工作。
    咨询电话:0592-6020891 18906011628    //www.biohj.com QQ:1284882975

     

    (来源: 厦门慧嘉生物科技有限公司


    全年征稿 / 资讯合作

    联系邮箱:[email protected]

    版权与免责声明

    • 凡本网注明“来源:来宝网”的所有作品,版权均属于来宝网,转载请必须注明来宝网, 时时彩网络平台,违反者本网将追究相关法律责任。
    • 本网转载并注明自其它来源的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点或证实其内容的真实性,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品来源,并自负版权等法律责任。
    • 如涉及作品内容、版权等问题,请在作品发表之日起一周内与本网联系,否则视为放弃相关权利。
  • 李克强:扩大跨省异地就医直接结算范围 2019-08-11
  • 次仁卓玛一家的端午节 2019-08-11
  • 市人大常委会召开党组会议传达学习全国两会精神张轩主持并讲话 2019-08-09
  • 世界杯期间在家撸串的正确姿势-热门标签-华商网数码 2019-08-06
  • 兴业银行获第十二届人民企业社会责任奖年度企业奖 2019-08-02
  • 宝马中国创新日暨上海研发中心揭幕 专注于高新技术 2019-08-01
  • 解放军报评论员:担当起党和人民赋予的新时代使命任务 2019-08-01
  • 别人家的中年男子 听音识木一把琴能卖30万 2019-07-18
  • 《贪婪之秋》延期至2019年 E3新宣传片公开 2019-06-25
  • 《关于发展租赁型职工集体宿舍的意见(试行)》正式发布实施 2019-06-24
  • 网约车陷阱多 谨防四类风险 2019-06-19
  • 太原设禁鸣路段 设备在测试中 2019-06-19
  • 歌浴森专辑写真曝光 俏皮可爱萌态十足 2019-06-09
  • 破11个赛季不胜魔咒 山东客场击败广厦 2019-06-09
  • 喝了6瓶劲酒和1斤白酒 男子手持钢锯在重庆西站撒泼遭控制 2019-06-01
  • 6场半全场14092期分析 南粤36选7历史开奖记录 梦群平特肖统计 极速时时彩结果 15选5中奖规则及奖金图表 极速飞艇官网下载 福建体彩11选五开奖结果 11选5任3必中计算方法 英超宝贝爱丽丝写视频 体彩任选9场胜负规则 浙江6十1开奖号码历史查询 浙江大乐透走势图 内蒙古时时彩走势带线 河南22选5杀号定胆 福彩p62近300期走势图