• 人民网欧洲中心分社记者报道集 2019-09-06
  • 图解:短视频平台频遭约谈敲响警钟,野蛮生长要不得! 2019-09-06
  • 中考期间广州部分公交线路有调整 2019-09-01
  • 减肥必备!这十种食物饱口福还能吃出好身材 2019-09-01
  • “蛟龙” 吸引世界目光(砥砺奋进的五年·重大工程巡礼) 2019-08-19
  • 李克强:扩大跨省异地就医直接结算范围 2019-08-11
  • 次仁卓玛一家的端午节 2019-08-11
  • 市人大常委会召开党组会议传达学习全国两会精神张轩主持并讲话 2019-08-09
  • 世界杯期间在家撸串的正确姿势-热门标签-华商网数码 2019-08-06
  • 兴业银行获第十二届人民企业社会责任奖年度企业奖 2019-08-02
  • 宝马中国创新日暨上海研发中心揭幕 专注于高新技术 2019-08-01
  • 解放军报评论员:担当起党和人民赋予的新时代使命任务 2019-08-01
  • 别人家的中年男子 听音识木一把琴能卖30万 2019-07-18
  • 《贪婪之秋》延期至2019年 E3新宣传片公开 2019-06-25
  • 《关于发展租赁型职工集体宿舍的意见(试行)》正式发布实施 2019-06-24
  • 来宝网Logo

    热门词:生物显微镜 水质分析仪 微波消解 荧光定量PCR 电化学工作站 生物安全柜

    现在位置时时彩网络平台>技术资料首页>产品信息>说明书>兔乙酰胆碱(ACh)ELISA试剂盒说明书

    天津市快速路限行: 兔乙酰胆碱(ACh)ELISA试剂盒说明书

    上海宝特生命科学发展有限公司2011年4月25日 9:31 点击:773

    时时彩网络平台 www.qlgr.net 兔乙酰胆碱(ACh)ELISA试剂盒说明书
    本试剂盒仅供研究研究使用                                    

    预期应用
    ELISA法定量测定兔血清、血浆、细胞培养物上清或其它相关液体中乙酰胆碱含量。

    实验原理
    本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中Ach水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入Ach、生物素化的抗兔Ach抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的Ach呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
    试剂盒组成
    1.         酶联板:一块(96孔)

    2.         标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,其浓度为10000pg/L,做系列倍比稀释后,分别稀释成1000 pg/L,500 pg/L ,250 pg/L,125pg/L,62.5pg/L,31.25 pg/L,15.6 pg/L,样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/L,临用前15分钟内配制。

    3.         样品稀释液:1×20ml/瓶。

    4.         抗体稀释液A:1×10ml/瓶。

    5.         抗体稀释液B:1×10ml/瓶。

    6.         检测溶液A:1×120μl/瓶(1:100)临用前以抗体稀释液A1:100稀释。

    7.         检测溶液B:1×120μl/瓶(1:100)临用前以抗体稀释液B1:100稀释。

    8.         底物溶液:1×10ml/瓶。

    9.         浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

    10.     终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

     
    标本的采集及保存

    1.细胞培养物上清:请离心后收集上清,并将标本保存于-20℃,且应避免反复冻融。

    2.血清:标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。

    3.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。

    注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
     
    操作步骤
    各试剂在使用前平衡至室温。

    1.         加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。除空白孔外,余孔分别加标准溶液或待测样品100μl,轻轻混匀,37℃,120分钟。

    2.         弃去液体,甩干,不用洗涤。

    3.         每孔加检测溶液A工作液 100μl,37℃,60分钟。洗板3次,350μl/每孔,甩干。

    4.         每孔加检测溶液B工作液 100μl,37℃,60分钟,洗板5次,甩干。

    5.         依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色30分钟。

    6.         依序每孔加终止溶液50μl,终止反应。用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。

    注:

    1. 每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是最后加底物溶液及2NH2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。

    2.为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内。

    洗板方法
    手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层
    吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.4ml注入孔内,浸泡1-2分钟,根据需要,重复此过程数次。
        自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
    特异性
        本试剂盒可同时检测重组或天然的兔Ach,且与其它相关蛋白无交叉反应。

    计算
      以标准物的浓度为横坐标(对数坐标),OD值为纵坐标(普通坐标),在半对数坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

    注意事项
    1.  洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。

    2.  一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

    3.  请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。

    4.  如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请最后乘以稀释倍数。

    5.在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。

    6.底物请避光保存。

    检测范围:
    15.6 pg/mL -1000 pg/mL

    说明
    1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。

    2.有效期:6个月

    3.浓洗涤液会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。

    4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。

     
     

    (来源: 上海宝特生命科学发展有限公司


    全年征稿 / 资讯合作

    联系邮箱:[email protected]

    版权与免责声明

    • 凡本网注明“来源:来宝网”的所有作品,版权均属于来宝网,转载请必须注明来宝网, 时时彩网络平台,违反者本网将追究相关法律责任。
    • 本网转载并注明自其它来源的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点或证实其内容的真实性,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品来源,并自负版权等法律责任。
    • 如涉及作品内容、版权等问题,请在作品发表之日起一周内与本网联系,否则视为放弃相关权利。
  • 人民网欧洲中心分社记者报道集 2019-09-06
  • 图解:短视频平台频遭约谈敲响警钟,野蛮生长要不得! 2019-09-06
  • 中考期间广州部分公交线路有调整 2019-09-01
  • 减肥必备!这十种食物饱口福还能吃出好身材 2019-09-01
  • “蛟龙” 吸引世界目光(砥砺奋进的五年·重大工程巡礼) 2019-08-19
  • 李克强:扩大跨省异地就医直接结算范围 2019-08-11
  • 次仁卓玛一家的端午节 2019-08-11
  • 市人大常委会召开党组会议传达学习全国两会精神张轩主持并讲话 2019-08-09
  • 世界杯期间在家撸串的正确姿势-热门标签-华商网数码 2019-08-06
  • 兴业银行获第十二届人民企业社会责任奖年度企业奖 2019-08-02
  • 宝马中国创新日暨上海研发中心揭幕 专注于高新技术 2019-08-01
  • 解放军报评论员:担当起党和人民赋予的新时代使命任务 2019-08-01
  • 别人家的中年男子 听音识木一把琴能卖30万 2019-07-18
  • 《贪婪之秋》延期至2019年 E3新宣传片公开 2019-06-25
  • 《关于发展租赁型职工集体宿舍的意见(试行)》正式发布实施 2019-06-24
  • 赚钱最快的方法 30选5开奖第73期 一尾中特网 彩票11选5技巧 11选5选号技巧 宝马论坛二生肖中特今晚 福彩时时彩开奖结果48 2元彩票下载 qq兼职是真的吗 承德市福利彩票中心 6场半全场18131期预测 吉林快3跨度 看辽宁十一选五走势图表 3d排列5开奖号 浙江20选5基本走势图