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    正规的网上买彩票软件: 柴胡注射液对小鼠学习记忆功能的影响

    上海软隆科技发展有限公司2013年5月23日 15:02 点击:899

    时时彩网络平台 www.qlgr.net  摘 要目的探讨柴胡注射液对学习记忆行为影响的机制。方法每天次给予小鼠腹腔注射不同剂量的柴胡注射液连续天后采用行为观察和生化检测相结合的方法研究柴胡注射液对小鼠学习记忆行为的影响包括剂量效应关系和时间效应关系以及脑内超氧化物歧化酶( SOD) 、丙二醛( MDA) NO 含量的变化。结果与注射生理盐水的对照组相比种剂量( 50 、100 、200 、400 800 mg / kg) 中除了50 mg / kg 其他种剂量的柴胡注射液均能显著提高小鼠Y- 迷宫分辨学习的能力及24 h 记忆保持率其中400 mg / kg 剂量的效果最好最佳剂量的柴胡注射液易化记忆的作用在训练后24 ~ 72 h 均显著增强( P < 0.01 ) , 24 h 最为显著最佳剂量的柴胡注射液可显著提高行为训练后小鼠脑内SOD 的活性( P < 0.01 ) 、降低脂质过氧化产物MDA 水平( P < 0.01 ) 以及提高NO 含量( P < 0.01 ) 。结论适当剂量的柴胡注射液在一定时间内具有提高小鼠学习记忆能力的功效该作用可能与伴随的脑组织抗氧化能力提高和NO 含量改变有关。关键词柴胡学习记忆超氧化物歧化酶丙二醛一氧化氮学习和记忆是神经科学研究中的一个重要领

    越来越多证据表明机体内过量自由基的产生与学习记忆密切相关.近年来研究发现柴胡对缺血再灌注引起的肝肾损伤具有?;ぷ饔?/font>其机制可能与抑制氧自由基形成有关但关于其对学习记忆的影响尚未有报道。因此本研究通过对柴胡小鼠学习记忆行为和脑内生化指标的观测初步探讨柴胡改善学习记忆的作用及机制。

    材料和方法

    1.1 材料

    昆明种小鼠雄雌各半体重18 ~ 22 g, 由东南大学公共卫生学院动物实验中心提供适应性饲养天后正式进入实验。柴胡注射液1 ml 含柴胡生药1 g) 为陕西西安亚宝制药厂生产批号20030404 ; 脑内超氧化物歧化酶( SOD) 测定试剂盒批号20031003 ) 、丙二醛( MDA) 测定试剂盒批号20031003) 、NO 测定试剂盒批号20031003) 及考马斯亮兰蛋白测定盒批号20031003 ) 均由南京建成生物工程公司提供。其他试剂均为分析纯。

    1.2 方法

    1.2.1 分组及给药方法

    140 只小鼠随机分成空白对照组、生理盐水对照组、50 mg / kg 柴胡组、100 mg / kg 柴胡组、200 mg / kg 柴胡组、400 mg / kg 柴胡组和800 mg / kg柴胡组。各组小鼠按各自所配浓度0.2 ml / 10g 腹腔注射每天间隔8 h , 连续给药生理盐水对照组腹腔注射等体积生理盐水。1.2.2 Y- 迷宫分辨学习的检测方法小鼠分辨学习能力的检测按文献[ 5 ] 方法进行。天内连续分段训练小鼠10 次为一段两段间小鼠休息1 min , 一直训练到10 次反应中有次正确反应90% 的正确反应率作为学会的标准。记录小鼠达到学会标准所需训练的次数次数越少说明学习能力越强。将给予柴胡处理的小鼠达到学会

    标准所需训练的次数与正常小鼠达到学会标准所需训练的次数相比计算学习改善率反映小鼠学习能力改变的情况。间隔24 h 检测小鼠在10 次训练中的正确次数代表小鼠的24 h 记忆成绩。将小鼠的24 h 记忆成绩与学会的标准相比计算24 h 记忆保持率。同法检测小鼠的48 72 h 记忆保持率。保持率越高说明动物的记忆力越好。1.2.3 小鼠脑组织SOD 活性、MDA 含量及NO 含量的测定SOD 活性测定 小鼠行为检测后立即断头处死冰上取大脑用生理盐水制备10% 脑组织匀浆液, 4℃离心取上清液721 型分光光度计在波长550 nm 处测定其光密度值并按公式算出SOD 的活性。MDA 含量的测定 小鼠行为检测后立即断头处死冰上取大脑用生理盐水制备2 % 脑组织匀浆液, 4 ℃离心取上清液721 型分光光度计在532 nm 波长处测定其光密度值再按公式求出MDA 生成量。NO 含量的测定 实验结束后小鼠立即断头处死冰上分离大脑去除嗅球和小脑用冰生理盐水冲洗血迹再用滤纸擦干电子分析天平称重按脑组织生理盐水为0.5 g 1 ml 比匀浆3 000 r / min,4℃离心15 min , 取上清液冻存待测。由专业技师严

    格按照操作说明进行操作。

    1.3 统计学方法

    Grubb 法对实验数据的可疑值进行取舍数据以均数±标准差( x ±s ) 表示组间比较采用检验。P < 0.05 为差异有显著性。

    结 果

    2.1 柴胡注射液对小鼠学习记忆影响的剂量效应关系Y- 迷宫行为检测结果显示不同剂量的柴胡注射液对小鼠分辨学习能力和记忆保持的影响并不一致。如表所示与生理盐水对照组相比50 mg / kg 剂量的柴胡注射液组对小鼠的分辨学习能力的影响无统计学意义外其他种剂量的柴胡注射液均显著增强小鼠的分辨学习能力( P < 0.01 ) ,

    呈明显的剂量效应关系对记忆保持百分率而言,50 mg / kg 剂量以外其他种剂的柴胡注射液都有明显易化记忆的作用。与生理盐水对照组相比,100 ~ 800 mg / kg 的剂量都显著提高24 h 的记忆持率其中400 mg / kg 的效果最好其记忆保持率提高34.45% 。

    2.2 柴胡注射液对小鼠记忆影响的时间效应关系由上述量效关系说明400 mg / kg 的柴胡注射液对小鼠24 h 记忆保持的易化作用最佳。本实验进一步用该剂量观察了柴胡注射液对小鼠Y- 迷宫分辨学习的48 72 h 记忆保持的影响。结果表明400mg / kg 的柴胡注射液易化记忆的作用在训练后24 ~72 h 均显著增强( P < 0.01 ) , 24 h 最为显著虽然48 ~ 72 h 有所下降但仍明显地优于该时相的生理

    2.3 柴胡注射液对小鼠脑组织SOD 活性和MDA生成的影响为探讨柴胡注射液提高小鼠分辨学习能力增强记忆的脑内机制空白对照组、生理盐水对照组和最佳剂量( 400 mg / kg) 柴胡注射液组的小鼠行为检测后进行脑组织SOD 活性和MDA 含量的测定。该剂量的柴胡注射液能明显提高脑组织SOD 活性减少MDA 的生成( P < 0.01 ) 。

    2.4 柴胡注射液对小鼠脑组织NO 含量的影响实验发现柴胡注射液400 mg / kg 能明显提高正常小鼠脑内NO 的含量( P < 0.01 ) 

    讨 论

    学习记忆是大脑最高级的功能是衡量动物发育的重要指标。国内外多采用建立条件反射的方法检测动物的行为和高级脑功能其中Y- 迷宫法广泛应用最为广泛。本实验结果显示柴胡注射液在一定剂量范围内能明显提高小鼠在Y- 迷宫中的分辨学习能力和记忆的影响力其易化记忆的效应在训练后24 h 最佳虽然48 ~ 72 h 有所下降但仍明显地优于该时相的生理盐水对照组其中最佳剂量组小鼠伴随有脑组织中SOD 活性的提高和MDA 水平的下降。SOD 是机体抗脂质过氧化酶促防御系统中的一个重要酶它能特异性清除生物氧化产生的超氧阴离子自由基。自由基可引发脂质过氧化的链式反应过氧化脂质的分解终产物MDA 通过交联、结合形成脂褐素损伤细胞膜引起神经系统的功能障

    在行为上表现为脑功能的衰退。因此本研究认为柴胡改善小鼠学习记忆功能可能与其伴有SOD 活性的提高从而增强SOD 终止自由基链锁反应的作用间接减少MDA 的产生有关但具体机制还需深入探讨。本实验观察到柴胡注射液最佳剂量组的小鼠脑

    组织中NO 含量与生理盐水组相比明显提高( P <0.01 ) , 提示柴胡改善学习记忆能力的作用可能与其提高脑组织中NO 的含量关系密切。目前普遍认为海马突触效应的长时程增强( LTP ) 可能是学习记忆的突触机制, NO 作为逆向信使参与LTP 的形成和维持过程。动物学习记忆过程中不同脑区的NO 水平增高本实验结果与此相符。诚然也有研究发现伴有空间学习障碍的小鼠海马部位的NO含量增多, NO 介导神经毒性作用从而损伤学习记

    忆功能。笔者推测这可能与NO 具有神经毒性和神经营养的“双刃剑样”作用有关NO 含量在合理范围内波动时可能介导神经营养作用NO 的含量过低或过高时则表现为神经毒性作用。综上所述适当剂量的柴胡注射液在一定时间内具有提高小鼠学习记忆能力的功效该作用可能与其伴有脑组织抗氧化能力提高和NO 含量改变有关其机制值得进一步探讨

    (来源: 上海软隆科技发展有限公司


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