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    时时彩 庄闲: 高效液相色谱法测定畜禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量

    赛智科技(杭州)有限公司2011年4月14日 13:18 点击:1174

    时时彩网络平台 www.qlgr.net 1.实验目的

      据标准GB/T14931.1-94测定畜禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量。最低检出浓度为:0.15,0.20,0.65mg/kg。

      2.试验原理

      样品经提取,微孔滤膜过滤后直接进样,用反相色谱分离,紫外检测器检测,与标准比较定量,出峰顺序为土霉素、四环素、金霉素。标准加法定量。

      3.试剂

      3.1乙腈(分析纯)。

      3.20.01mol/L磷酸二氢钠溶液:称取1.56g(±0.01g)磷酸二氢钠(NaH2PH4.2H2O)溶于蒸馏水中,定容到100mL,经过滤器过滤(选用微孔滤膜为0.45μm),备用。

      3.3土霉素(OTC)标准溶液:称取土霉素0.0100g(±0.0001g),用0.1mol/L盐酸溶液每毫升含土霉素1mg。

      3.4四环素(TC)标准溶液:称取四环素0.0100g(±0.001g),用0.01mol/L盐酸溶液溶解并定容10.00mL,此溶液每毫升含四环素1mg。

      3.5金霉素(CTC)标准溶液:称取金霉素0.0100g(±0.0001g),溶于蒸馏水并定容成10.00mL,此溶液每毫升含金霉素1mg。以上标准品均按1000单位/mg折算。3.3~3.5溶液应于4℃以下保存,可使用1周。

      3.6混合标准溶液:取3.3、3.4标准溶液各1.00mL,取3.5标准溶液2.00mL,置于10mL容量瓶中,加蒸馏水至刻度。此溶液每毫升含土霉素、四环素各0.1mg,金霉素0.2mg,临时现配。

      3.75%高氯酸溶液。

      4.仪器

      4.1高效液相色谱仪(HPLC):具紫外检测器。赛智科技(杭州)有限公司

      4.2振荡器:天津市恒奥科技发展有限公司

      4.3过滤器:天津市恒奥科技发展有限公司

      4.4超声波:天津市恒奥科技发展有限公司

      5.色谱条件

      5.1柱:ODS-C18(5μm)6.2mm×15cm。

      5.2检测波长:355nm。

      5.3灵敏度:0.002AUFS。

      5.4柱温:室温。

      5.5流速:1.0mL/min。

      5.6进样量:10μL。

      5.7流动相:乙腈/0.01mol/L磷酸二氢钠溶液(用30%(V/V)硝酸溶液调节pH2.5),35:65(V/V),使用前用超声波脱气10min。

      6.操作方法

      6.1样品测定:称取5.00g(±0.01g)切碎的肉样(<5mm),置于50mL锥形烧瓶中,加入5%高氯酸25.0mL,于振荡器上振荡提取10min,移入到离心管中,以2000r/min离心3min,取上清液经0.45μm滤膜过滤,取溶液10μL进样,记录峰高,从工作曲线上查得含量。

      6.2工作曲线:分别称取7份切碎的肉样,每份5.00g(±0.01g),分别加入混合标准溶液0、25、50、100、150、200、250μL(含土霉素、四环素各为0、2.5、5.0、10.0、15.0、20.0、25.0μg,含金霉素0、5.0、10.0、20.0、30.0、40.0、50.0μg),按6.1方法操作,以峰高为纵坐标,以抗生素含量为横坐标,绘制工作曲线。

    (来源: 赛智科技(杭州)有限公司


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