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    abs9233 增强型BCA蛋白定量试剂盒

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    产    地:上海更新时间:2019/7/15 13:41:34

    品    牌:absin型    号:abs9233

    状    态:正常点击量:126

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    产品介绍

    描述
    BCA法是理想的蛋白质定量方法,在碱性环境下蛋白质分子中肽键结构与Cu2+络合并将Cu2+还原成Cu1+。BCA特异地与Cu1+结合形成稳定的紫蓝色复合物,在562nm处有最大的光吸收值并与蛋白质浓度成正比,颜色的深浅与蛋白质的含量成正比,可以根据吸收值测定蛋白质浓度。该测定方法灵敏度高,操作简单,试剂及其形成的颜色复合物稳定性俱佳,并且受干扰物质去垢剂等影响小。
    ?
    产品特点:
    1、准确灵敏,线性范围广,BCA试剂的蛋白质测定范围是0.5~30ug/mL;
    2、快速:45min内完成测定,比经典的Lowry法快4倍而且更加方便;
    3、不受样品中离子型和非离子型去污剂影响;
    4、检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马氏亮蓝,可以酶标板法或分光光度计法测定蛋白质浓度。
    ?
    组分:
    品名包装
    BCA蛋白定量A1液50mL
    BCA蛋白定量A2液50mL
    BCA蛋白定量B液4mL
    5mg/mL BSA1mL
    使用方法
    实验流程:?
    1、BSA 标准品的?。?br style="margin: 0px; padding: 0px;"/>(1)取 20uL 5mg/mL BSA 标准品稀释至 1000uL,使其终浓度为 100ug/mL。蛋白样品在什么 溶液中溶解,BSA 应用相应的溶液稀释。通常情况下,为了方便,可用蒸馏水稀释。
    (2)在 96 孔板中分别加入 0、7.5、15、30、45uL 稀释后的标准品(100ug/mL BSA),再分 别加入 150、142.5、135、120、105uL 蒸馏水,每孔总体积为 150uL。建议每种浓度做 2~3 个复孔。?
    2、BCA 工作液的准备:
    (1)按下列公式计算所需要的 BCA 工作液体积; (标准曲线+未知样品个数)×(重复次数)×(每个样品所需的 BCA 工作液体积)=所需要 BCA 工作液的总体积 例如:需要测定标准曲线和 3 个样品的蛋白浓度,每个实验重复 2 次,每次实验需要 150uL 工作液:(5 个标准曲线点+ 3 个样品) × (2 次重复) × (0.15mL) = 2.4mL 工作液?
    (2)将 25 份 A1 液、25 份 A2 液与 1 份 B 液混合后得到工作液。 例如需要 5.1mL 工作液,取 2.5mL A1 液+2.5mL A2 液+0.1mL B 液,混合既得。 注意:当 B 液加入 A1、A2 液时,可看见浊度,轻轻晃动后消失,工作液为绿色。?
    3、样品检测 在 96 孔板中加入适当体积的样品,用蒸馏水将样品体积补至 150uL。?
    4、在各孔(标准曲线孔和样品孔)中分别加入 150uL BCA 工作液,60℃孵育 60min;?
    5、在 562nm 处测其吸光度值,绘制标准曲线。?
    6、根据标准曲线计算蛋白浓度。
    性能
    保存方法BCA蛋白定量试剂盒A、B应保存于2~8℃;5mg/mL BSA应保存于-20℃。
    注意事项
    1、将 A1、A2、B 液恢复到室温再使用,有利于提高检测的灵敏度。若液体出现物质析出,请室温平衡后,轻轻晃动,使其溶解后再使用。
    2、蛋白标准请混匀后,再稀释成一系列不同浓度的蛋白标准。
    3、请尽量使得待测样品蛋白的浓度在 0.5~30ug/mL 之间。
    4、需酶标仪一台,最佳检测波长为 562nm,并需 96 孔板。

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